ZIV ir fluorescējošs in situ hibridizācija. FISH testēšana vai FISH analīze, kā tas dažkārt tiek minēts, ir salīdzinoši jauna citoģenētiska metode, kas ļauj citoģenētikam noteikt, cik daudz konkrētas hromosomas eksemplāru ir klāt, neveicot visus posmus, kas saistīti ar kariotipa ražošanu. Piemēram, FISH analīze var ātri pateikt, cik daudz ir 21 hromosomu, bet tas nevar jums pastāstīt par šo hromosomu struktūru.
Kā tas darbojas? FISH testēšana parasti tiek veikta ar tādiem pašiem paraugiem kā kariotips – asinis, amnija ceturtdaļas vai horiionskābes parauga paraugi. FISH tests tiek veikts, izmantojot fluorescējošu zondi, kas saistās ar noteiktām specifiskām hromosomām. Šīs fluorescējošās zondes ir izgatavotas no DNS, kas raksturīgas noteiktām hromosomām, un tiek marķētas ar fluorescējošu krāsvielu. FISH analīzē izmantotās šūnas nav jāaudzē vai kultivē (tas var ilgt 7-10 dienas), tāpēc FISH analīzes rezultāti ir pieejami daudz ātrāk nekā kariotipa rezultāti.
Parasti paraugu iegūst un nosūta laboratorijai, un hromosomas tiek izolētas uz slaida. Tad zondes novieto uz slaida un ļauj apmēram 12 stundām hibridizēt (vai atrast atbilstību). Tā kā zondes ir izgatavotas no DNS, tās saistās ar specifiskās hromosomas "saskaņošanas" DNS. Piemēram, no DNS, kas raksturīga hromosomai 21, izveidotais zondes saistās ar jebkuru klāt esošo 21 hromosomu.
Pēc hibridizācijas (vai uzlīmēšanas) slaidu pārbauda ar īpašu mikroskopu, kas var redzēt fluorescējošus attēlus. Novērtējot fluorescējošo signālu skaitu, citoģenētikas speciālists var noteikt, cik daudz no konkrētās hromosomas atrodas. Piemēram, cilvēks bez Down sindroma saņems divus fluorescējošos signālus, kas atbilst viņu divām 21 hromosomām.
Personai ar trisomiju 21 būs trīs fluorescējoši signāli, kas atbilst viņu trim numuriem – 21 hromosomām. Parasti citoģenētiķi izmantos zondes 13, 18, 21, X un Y hromosomām. Tās ir hromosomas, kas var izraisīt trisomijas cilvēkiem.
Diagnosticēšana Down sindroms
Lai gan tas neatsaucas uz faktisko struktūru analizēto hromosomu, FISH analīze var pateikt, cik daudz konkrētu hromosomu kopijas ir klāt. Dauna sindromā citoģenētisms izmanto zondes 21. Hromosomas gadījumā. Ja mikroskopā ir redzami trīs fluorescējošie signāli, tad tiek izveidota Dauna sindroma diagnoze.
Kā FISH testēšana atšķiras no kariotipa?
FISH analīze tikai norāda, ka ir zināmas hromosomas, un cik no tām ir klāt. Piemēram, tipiska FISH analīze pateiks, cik daudz 13, 18, 21, X un Y hromosomu atrodas amnija šķidruma paraugā. FISH analīze nesniegs jums informāciju par katru hromosomu, kā arī nesniegs jums informāciju par faktisko hromosomu struktūru.
Priekšrocības
Galvenā FISH analīzes priekšrocība ir tā, ka tā var ātri sniegt informāciju par noteiktām hromosomām. Piemēram, pēc trim līdz četrām dienām tā var pateikt, cik daudz konkrēta cilvēka 21 skaita hromosomas eksemplāru var būt.
Savukārt tradicionālais kariotips var ilgt pat divas nedēļas.
Trūkumi
FISH analīzes galvenais trūkums, salīdzinot ar kariotīpēšanu, ir tas, ka FISH analīze sniedz mazāk informācijas par visiem pētītajiem hromosomiem. Piemēram, tipisks pirmsdzemdību FISH tests jums pateiks, cik daudz ir 13, 18, 21, X un Y hromosomu (piemēram, vai ir divas vai trīs eksemplāri), bet neiesniedzs nekādu informāciju par kādu citu hromosomu vai jebkuru informāciju par faktisko hromosomu struktūru.
Ko uzdot savu ārstu
Vai laboratorijā, kuru lietojat, veicat FISH testēšanu?
- Vai mana apdrošināšana sedz FISH testēšanas izmaksas?
- Cik uzticama ir FISH testēšana Down sindromā?
- Cik ilgs laiks notiks, lai iegūtu FISH rezultātus (no mana amnio vai CVS)?
- Vai laboratorija arī veic pilnu kariotipu?
- Cik ilgs laiks nepieciešams, lai iegūtu kariotipa rezultātus?
- Grunts līnija
FISH analīze dod priekšroku ātrai, bet ierobežotai informācijai par augļa hromosomām. Tas ir ļoti labi, atbildot uz jautājumu – "Vai manam bērnam ir trisomija 21?", Bet tas sniedz ierobežotu informāciju par citām strukturālām hromosomu patoloģijām, piemēram, translocations un deletions.
